DWD-1 UV ডিটেক্টর (উচ্চ পারফরম্যান্স ডাবল বিম ডাবল তরঙ্গদৈর্ঘ্য) অন্তর্নির্মিত ডেটা প্রক্রিয়াকরণ

তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিসীমা: 254nm, 280nm (একই সময়ে সনাক্ত) এবং 254nm, 280nm-400nm বর্ণালীর মধ্যে দুটি তরঙ্গদৈর্ঘ্য একই সময়ে সনাক্ত করা হয়।

* DWD-1 যন্ত্র বৈশিষ্ট্য

প্রোটিন 280nm / 254nm ডাবল তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিমাপ:

প্রোটিন অণুতে সংযুক্ত দ্বৈত বন্ধন টাইরোসিন, ট্রেনিন এবং অন্যান্য সুগন্ধিত অ্যামিনো অ্যাসিড রয়েছে। তাদের অতিবেগুনি আলো শোষণের বৈশিষ্ট্য রয়েছে, তার শোষণ শীর্ষ 280nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যের মধ্যে, এবং এই তরঙ্গদৈর্ঘ্যের মধ্যে শোষণ শীর্ষের অপটিক ঘনত্বের মান তাদের ঘনত্বের সাথে ইতিবাচক সম্পর্ক রয়েছে, তাই প্রোটিনের গুণ কিন্তু যেহেতু বিভিন্ন প্রোটিনের টাইরোসিন এবং ট্রেনিনের পরিমাণ ভিন্ন, তাই সঠিক পরিমাণ নির্ধারণ করার জন্য, পরীক্ষার জন্য প্রোটিনের বিশুদ্ধ পণ্য এছাড়াও, অনেক অ-প্রোটিন পদার্থের 280nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যের অধীনে নির্দিষ্ট শোষণ ক্ষমতা রয়েছে, যা হস্তক্ষেপ হতে পা বিশেষ করে নিউক্লিয়াম অ্যাসিড (পুরিন এবং পিরিমিনিন) এর প্রভাব আরও গুরুতর। 280nm এ শোষণ প্রোটিনের চেয়ে 10 গুণ শক্তিশালী (প্রতি গ্রাম), কিন্তু নিউক্লিয়ান এসিড 254nm এ শোষণ শক্তিশালী, যার শোষণ শিখর 254nm এর কাছাকা নিউক্লিয়ান অ্যাসিডের 254nm এ লাইট ডিসাইভারেন্ট 280nm এর চেয়ে দ্বিগুণ বেশি,

প্রোটিনের বিপরীতে, 280nm UV শোষণ মান 254nm শোষণ মানের চেয়ে বেশি।

সাধারণত：

বিশুদ্ধ প্রোটিনের আলো শোষণ অনুপাত: A280 / A254 "1.8

বিশুদ্ধ নিউক্লিয়ান অ্যাসিডের আলো শোষণ অনুপাত: A280/A254 0.5

সুতরাং যখন প্রোটিনের সমাধানে একই সময়ে নিউক্লিয়ন অ্যাসিড উপস্থিত থাকে (বেশিরভাগ জৈবিক সিস্টেমের জন্য), তখন OD254nm এবং OD280nm একই সময়ে পরিমাপ করা উচিত। তারপর দুই তরঙ্গদৈর্ঘ্যের শোষণের অনুপাতের উপর ভিত্তি করে, নিউক্লিয়ান অ্যাসিডের প্রভাব দূর করার জন্য অভিজ্ঞতামূলক সূত্রের মা

প্রোটিন ঘনত্ব = 1.45 × A280-0.74 × A254 (মিলি / মিলি)

এই অভিজ্ঞতামূলক সূত্রটি প্রোটিন (ইজিস্ট এনলোলাইজেস) এবং নিউক্লিয়ান অ্যাসিড (ইজিস্ট নিউক্লিয়ান অ্যাসিড) এর বিভিন্ন পরিচিত ঘনত্বের